1材料与方法
1.1试验动物和疫苗
疫苗免疫试验于2008年3—7月在河北省唐山市玉田牧富公司 种猪场进行,该场为拥有基础母猪1 500头的原种猪场。首先通过全群系统监测了解猪群的免疫状况,选择3头同期分娩的健康长白纯种母猪所产仔猪进行试验,期间试验猪按猪场正常生产流程管理,所有仔猪所处环境条件和饲养管理条件相同。
猪肺炎支原体疫苗为喜可舒(Mypravacsuis),由海博莱生物大药厂生产,批号为5M9K-1,有效期到2009年4月,每次免疫均为肌肉注射l头份,即2mL。猪瘟疫苗为脾淋苗,浙江荐量生物工程有限公司生产,批号为971168,有效期到2008年11月,首免4头份,二免1头份。种猪的猪瘟 免疫程序为1年2次普免。
1.2试验设计
母猪编号为Sl、S2、S3,每头母猪所产12头仔猪随机平均分到A、B、C、D4个组中,并对每头仔猪打耳标编号,原圈饲养。
试验设计如表l所示,A组仅免疫猪瘟疫苗;B组和C组仔猪均在3周龄同时接种喜可舒和猪瘟疫苗,其中B组在仔猪颈部两侧分别注射,C组用喜可舒稀释猪瘟疫苗后混合注射;D组分别在不同时间点注射喜可舒和猪瘟疫苗,即2、4周龄注射喜可舒,3、8周龄接种猪瘟疫苗。
1.3血样采集
分别在1、3、8、10和13周龄疫苗接种之前前腔静脉采血,之后分离血清,-20℃冻存,待试验结束后统一检测。
1.4检测方法
猪瘟抗体的检测采用阻断ELISA方法,所用试剂盒为CIVTESTIM suis HC/PPC(海博莱生物大药厂生产),试验操作参照试剂盒说明书进行,抗体滴度用阻断率表示。
1.5统计分析
试验数据采用SPSS软件进行方差分析。
2试验结果
2.1各组猪瘟抗体检测结果
由于试验过程中仔猪的死亡以及采血 过程中的操作误差,本研究仅对1周龄、3周龄、8周龄、10周龄、13周龄5次采样都齐全的仔猪的猪瘟抗体滴度进行了分析。分析结果表明,在首免之前,即仔猪l周龄时,各组间猪瘟抗体滴度差异不显著(F=0.379,P=0.769>0.05);3周龄时,各组间差异不显著(F=0.892,P=0.462>0.05);8周龄时,各组间差异显著(F=4.073,P=0.021<0.05),进一步两两比较,C组极显著低于B组(P=0.002<0.01);10和13周龄时,各组间差异不显著(10周龄:F=0.320,P=0.81 1>0.05;13周龄:F=0.076,P=0.972>0.05)详见表2。
2.2各组猪瘟抗体滴度的变化情况
A组仔猪 仅在3、8周龄免疫猪瘟疫苗,除8周龄猪瘟抗体滴度显著低于3周龄(P=0.01<0.05)外,其余各时间点间差异不显著,见图1。
B组仔猪是在1、3周龄免疫喜可舒,3、8周龄免疫猪瘟疫苗,其中3周龄时喜可舒二免与猪瘟首免同时进行,但是在仔猪颈部两侧分别注射。统计分析表明,l、3、8、10、13周龄各时间点间猪瘟抗体滴度差异均不显著(F=1.146,P=0.354>0.05),见图2。
C组仔猪免疫程序与B组相同,但是在3周龄时,用喜可舒作为猪瘟疫苗的稀释液,将二者混合 注射。统计分析表明,猪瘟抗体滴度差异极显著(F=6.858,P=0.001<0.01),进一步两两比较,8周龄猪瘟抗体滴度极显著低于l、3、10、13周龄(P分别为O、0.001、0、0.005),其余各时间点间差异不显著,见图3。
D组仔猪猪肺炎支原体疫苗与猪瘟疫苗分别接种,即2、4周龄接种喜可舒,3、8周龄接种猪瘟疫苗。统计分析表明,猪瘟抗体滴度差异极显著(F=4.609,P=0.008<0.01),进一步 两两比较,8周龄猪瘟抗体滴度极显著低于l、3、lO周龄(P分别为0.007、0.004、0.004),其余各时间点间差异不显著,见图4。
3讨论
3.1猪肺炎支原体疫苗与猪瘟疫苗同时接种对猪瘟抗体生成无干扰作用
猪瘟和PRDC的防控是当前猪场非常关注的问题,免疫预防也是最有效的手段。但是如何合理安排免疫程序的确在很多猪场存在困扰。频繁接种、多次保定对仔猪产生较大的应激,在当前猪场,应激过大也是造成猪群免疫力下降、生长性能欠佳、疾病多发的重要原因。因此疫苗联合接种 一方面有利于减轻对猪群的应激作用,另一方面也节省劳动力。