猪细小病毒(porcine parvovirus, PPV)为 DNA 病毒,可以引起猪的繁殖障碍性疾病。该病的主要特征为受感染的母猪,特别是初产母猪及血清学阴性经产母猪发生流产、不孕、死胎、畸形胎、木乃伊胎及弱仔等,尤其以产木乃伊胎为主,而母猪本身并不表现除流产之外的临床症状,其他猪感染后也无明显的临床症状。血清反应阴性的母猪主要在妊娠的前半期经口鼻感染病毒,结果免疫机能不全的胎儿经胎盘受到感染,从而导致疾病。猪细小病毒在世界各地普遍存在,在已报道的猪群中呈地方流行性,该病毒还可以和猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒 2 型(PCV2) 及猪伪狂犬病毒(PRV)等许多病毒发生混合感染;同时还可以与附红细胞体原虫、沙门氏菌和大肠杆菌等某些细菌、寄生虫发生混合感染,混合感染导致疾病更加难以控制,给全球养猪业造成了巨大的经济损失。目前,疫苗免疫是控制猪细小病毒病的主要手段。
1 猪细小病毒疫苗的分类
猪细小病毒的防治主要以免疫预防为主。由于 PPV 血清型单一及其高免疫原性,使得疫苗接种成为控制 PPV 感染的一种行之有效的方法。目前用于防治猪细小病毒的疫苗主要有弱毒活疫苗和灭活疫苗,这两种疫苗使用最为广泛,在世界范围内取得了较好的效果。随着分子生物学技术的发展,猪细小病毒的新型疫苗正在研究与开发之中。包括基因工程亚单位疫苗、基因工程活病毒载体疫苗、基因疫苗等。
1.1 灭活疫苗
灭活疫苗又称死苗,是将病原体经理化方法灭活后,但仍保持其免疫原性而制成的疫苗。灭活疫苗具有安全性好,诱导产生抗体时间长,不需要低温保存等优点。但是灭活疫苗产生抗体慢,不能诱导细胞免疫反应,抗体水平相对活疫苗较低,需重复接种,使用剂量大,费用较高。PPV 灭活疫苗的研究、开发与应用已经历了 30 余年,目前仍是预防猪细小病毒感染的主要手段。免疫佐剂是影响 PPV 灭活疫苗的重要因素,Moliter 等比较了 14 种不同佐剂用于 PPV 灭活疫苗的效果,结果发现 50%氢氧化铝,顺丁烯乙酰(EMA)、油水乳剂及 DDA 作佐剂的疫苗,均诱导猪产生了高滴度的抗体,而用油佐剂、 SDS、L-121、氢氧化铝和油乳剂混合物作佐剂的疫苗产生的抗体滴度均较低。目前在 PPV 灭活苗的制备中,经常采用的佐剂是氢氧化铝和油水乳剂。
Mengeling 等将通过细胞培养增殖的 PPV 和 PRV,用 AEI 在 37℃灭活后混合,加入 10%氢氧化铝制成灭活二联疫苗用于免疫预防试验,结果发现 PRV-PPV 灭活二联疫苗具有良好的免疫保护作用。PRV,PPV,和 JEV 病均是引起母猪繁殖障碍的主要疾病,研制出灭活多联疫苗可以简化免疫程序,降低临床应激反应,适合规模化养猪业的发展趋势。通过二联苗和单联苗比较试验显示,二联苗与两种单苗免疫产生的抗体水平无显著差异。多种试验表明两种病毒抗原同时刺激机体没有相互干扰作用。