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猪链球菌感染 关节炎(3)
(二)关节炎型:关节腔积液,有的有纤维素性或脓性渗出物; 死后剖检可见关节周围肿胀、充血,滑液浑浊,重者关节软骨坏死,关节周围组织有多发性化脓灶。常与败血症、脑膜炎型一起发生。 (三)、脑膜脑炎型: 死后剖检可见脑膜充血、出血,脑脊液浑浊,脑实质有化脓性脑炎病变。致病性Ⅱ型猪链球菌引起的脑膜炎可造成持续的严重后果,引起的损失比其它血清型猪链球菌引起的病症都更为严重。 (四)化脓性淋巴结炎型 淋巴结肿大,发硬,化脓; 病猪经治疗后肿胀部位中央变软,皮肤坏死,破溃流脓,并逐渐痊愈。 六、诊断: (一).鉴别诊断: 本病应该注意与猪瘟、猪丹毒和猪肺疫相区别。 临床上猪链球菌常与附红细胞体病、副猪嗜血杆菌、猪瘟、水肿病、毛首线虫等疾病发生混合感染或继发感染。 (二).诊断方法: 根据猪链球菌病的流行特点、临床症状、病理变化、实验室检验等可以作出诊断。 在临床上,如果病猪不表现症状突然死亡,发现高烧、耳和鼻发绀、呼吸急促、神经症状(喝污脏水,向后走路等),部分有关节肿、跛行等症状的,均可怀疑为猪链球菌病。 如要准确判断,则需按规定进行实验室检查确诊。通常需要2~4天时间。主要用于做肝、脾、血液的涂片镜检,细菌分离鉴定,以及用PCR方法确认猪链球菌2型及检查是否具有毒力因子。 验室检验方法: 1.病料直接涂片染色镜检:即用组织或血液或脓汁涂片,用革兰氏染色后镜检,可见革兰氏阳性(紫色)短链球形或卵圆形细菌,也可呈单个散开或成双排列,无芽孢,有的可见到荚膜。 2.细菌分离鉴定:即先接种于硫乙醇酸盐肉汤增菌培养后,再转种于血液琼脂平板上接种,37℃培养24~48小时,形成大头针帽大小,无色、黏稠、露珠状菌落,菌落周围有完全透明的溶血环现象。 3.血清学试验 血清学方法包括协同凝集试验、荚膜反应试验、平板凝集试验、荚膜多糖的免疫印迹分析等。 (1).其中协同凝集试验应用最广,即将猪链球菌分型用抗血清与金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)A蛋白(SPA)相结合,再与待检的临床分离菌株作玻板凝集试验,阳性反应出现特异的颗粒状凝集物。 (2).荚膜反应的抗原为培养5 h~6 h的菌液(此时荚膜产生量最大),与抗血清混匀,直接在相差显微镜下观察,并设置空白对照进行比较,该法能分辨现有的35个血清型(1型~34型及1/2型)。 (3).平板凝集反应的方法是,将培养基制成链球菌的选择性培养基,再加50 mL/L的抗猪链球菌羊血清,制成平板,然后培养待检菌株,猪链球菌能形成大的沉淀圈,该法特异性大于94.5%,相对敏感率为88.7%。 (4).荚膜多糖的免疫印迹分析用来鉴定猪链球菌2型菌株,方法是先提取待检菌株的荚膜多糖,用PAGE分离,转移到PVDF膜上,用抗猪链球菌2型特异性抗体杂交,然后酶联显色,产生特征条带的为阳性。此法敏感、特异,但试验过程繁杂,故不适用于大规模的筛选鉴定。 4.多重PCR技术 Smith根据型特异性的荚膜多糖基因设计引物,研制出一种快速敏感的三重分型PCR,分别能同时从猪的扁桃体中检测出猪链球菌1型(或14)、2型(或1/2)和9型。利用CPS2J、CPS1I、CPS9H 3组基因,建立分型的多重PCR,它们的PCR产物大小分别为235、440、390 bp,它可以在同一个PCR体系中同时鉴定1型或14型、2型或1/2和9型。Marois C等[16]为了检测试验感染猪及无症状临床猪的扁桃体携带细菌状况,建立了检测猪链球菌2型和1/2型的复合PCR检测技术,主要是针对细菌的16 S RNA序列和CPS2J序列进行检测。Silva L M等[17]通过构建针对猪链球菌的GDH、CPS、EF、MRP、SLY、SsnA 6种基因的复合PCR,来鉴定和寻找毒力菌株的特征。PCR技术明显地弥补了生化鉴定的不足,提高了鉴定的效率和准确性。适合于分子诊断和流行病学调查,同时为控制和根除猪链球菌病提供了有效的检测方法。
时间:2013-12-08 20:17:57
来源:网络
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