- 病料抹片、染色、镋检取病、健组织交界处组织，制成抹片，用等量酒精与乙 醚混合液固定，用碱性复红一美蓝、稀释石炭酸复红或碱性美蓝染色，镜检可见佛珠状的 长丝形菌体或细小杆菌。
- 细菌分离培养将采取的病料，立即置厌氧条件下进行接种培养。为防止杂菌污 染，最好将病料通过易感动物，获得纯培养后，再做进一步鉴定。或者初次分离时，用含 0.02%结晶紫、0.01%孔雀和苯乙基乙醇的卵黄培养基，以抑制杂菌的生长；也有选用新 霉素、万古霉素、链霉素作为抑菌剂的。病料接种后马上放在含有10%CO2、80%N2、 10%H2和以冷钯为催化剂的厌氧缸内培养，培养48?72h后，可见长出一种带蓝色的菌 落，中央不透明，边缘有一圈亮的光带。选出可疑菌落，再进一步做纯培养和进行生化特 性鉴定。
- 动物试验由于病料常有污染，可将病料用生理盐水或肉汤制成悬液，取0.5? l.OmL接种家兔耳外侧皮下，或0.2?0.4mL接种于小鼠尾部皮下。实验动物，于接种 后2?3天，接种局部发炎、坏死和脓肿，逐渐消瘦，局部坏死，8?12天死亡。取死亡 动物肝、脾、肺和心脏等组织分离出坏死杆菌，便可做出诊断。
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