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2016年夏季毛皮动物犬瘟热及细小病毒性肠炎抗体检测报告

sundekang 特养产业报2017-06-19 11:10:58

【导读】2016年夏季毛皮动物犬瘟热及细小病毒性肠炎抗体检测报告李富金，李金波，李秀娟，秦绪伟2016年夏季,采集了国内毛皮动物主产区837份毛皮兽母兽、仔兽、免疫仔兽的血样,分离血清,检测其犬瘟热及细小病毒性肠炎抗体。结果表明:断奶后母兽犬...

李富金，李金波，李秀娟，秦绪伟

2016年夏季,采集了国内毛皮动物主产区837份毛皮兽母兽、仔兽、免疫仔兽的血样,分离血清,检测其犬瘟热及细小病毒性肠炎抗体。结果表明:断奶后母兽犬瘟热SN抗体均值为91.6,细小病毒性肠炎HI抗体均值(log2)为10.4,抗体水平高,对两种传染病有足够保护,提供了较高的母源抗体;未免疫仔兽犬瘟热反应抗体下降较快,35 d以上仔兽犬瘟热母源抗体不足以保护仔兽,细小病毒性肠炎HI抗体值较好,对仔兽有很好保护效果;健康动物疫苗免疫后抗体上升较快,免疫后15 d,抗体均值都远高于有效保护值,可以保护动物免于发病。

犬瘟热、细小病毒性肠炎是危害毛皮动物生产的最重要的两个病毒性传染病,动物抗体水平的高低及仔兽母源抗体消长直接影响着动物健康及疫苗免疫程序[1-7],抗体检测对指导生产有现实意义。为此,2016年5―8月份,笔者对山东、河北及东三省国内毛皮动物主产区内各日龄段的狐、貉、貂进行了血样抽检,现将检测情况报道如下：

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 血样 2016年5月末至8月中旬,在山东、河北及东三省毛皮动物主产区毛皮兽饲养场共采集血样837份,其中貂、狐、貉母兽血样152份,未免疫貂、狐、貉仔兽血样97份,免疫后当年貂、狐、貉血样588份。

1.1.2 采血及集血器具一次性静脉输液针、2 mL一次性注射器、V型管等。

1.1.3 试验设备超净工作台、CO2培养箱、离心机、冰箱、倒置显微镜、移液枪、96孔V型板、96孔细胞培养板等。

1.1.4 抗原与对照血清犬瘟热抗原(CDV-11株病毒含量≥105 TCID50/mL)、细小病毒抗原(MEV-RC1株病毒含量≥107 TCID50/mL);犬瘟热阳性血清(反应抗体≥200)、细小病毒性肠炎阳性血清(HI效价28);犬瘟热、细小病毒性肠炎阴性血清;以上抗原及血清均由齐鲁动物保健品有限公司生药研究所提供。

1.1.5 细胞及培养液 1%猪红细胞、Vero细胞、细胞培养液,均由齐鲁动物保健品有限公司生药研究所提供。

1.2 方法

1.2.1 待检血清制备将采集的血样离心(溶血的血样废弃),分离血清备用。

1.2.2 犬瘟热SN抗体检测待检血清灭能后,经倍比稀释,与CDV-11株病毒液等量(200 TCID50/0.1 Ml)混合,37℃反应30 min,接种至长成单层的Vero细胞96孔板上,每稀释度接种4孔,设病毒对照和细胞对照,每日观察、记录细胞病变(CPE)情况,利用Reed和Muench法计算结果。

1.2.3 细小病毒性肠炎(MEV)HI抗体检测带检血清灭能后,经脱敏处理,在96孔V型板上做倍比稀释,然后与MEV抗原(配成4单位病毒)反应30 min,之后加入1%猪红细胞,4℃作用30 min,观察凝集情况,记录HI抗体滴度。

2 结果

2.1 母兽抗体

2.1.1 母兽犬瘟热抗体毛皮动物母兽抗体各种动物略有不同，蓝狐最高，平均值达110.5，水貂略低,平均值为77.8。但都能达到有效保护值50[8-11]以上,并且抗体合格率近80%,总体上处于犬瘟热坚强免疫状态(表1)。

表1 不同品种母兽犬瘟热抗体值

Table 1. Different varieties of Fur mother"s antibody of CD

品种	血样数	抗体合格率/%	抗体平均值
银狐	35	83	89.1
蓝狐	54	88	110.5
貉	23	79	89.1
水貂	40	65	77.8
合计	152	79	91.6

2.1.2 母兽细小病毒性肠炎抗体毛皮动物母兽肠炎HI抗体（log2）各种动物略有不同,水貂最高,平均值达12.5,狐9.25,貉9.4,均能达到有效保护值5[12]上，处于肠炎坚强免疫状态(表2)。

表2 不同品种母兽细小病毒性肠炎HI抗体

Table 2. Different varieties of Fur mother"s HI antibody of ME

品种	血样数	抗体合格率/%	抗体平均值（log2）
狐	86	97.7	9.25
貉	22	95.4	9.40
水貂	36	100	12.50
合计	144	97.7	10.40

2.2 仔兽抗体

2.2.1 仔兽犬瘟热抗体狐、貉、水貂仔兽犬瘟热母源抗体消减较快,满月以上仔兽母源抗体均≤24.8,远低于50的有效保护值(表3)。

表3 不同品种仔兽犬瘟热抗体检测结果

Table 3. Different varieties of cubs antibody of CD

仔兽品种	血样	日龄
35	40	45～50
合格率/%	均值	合格率/%	均值	合格率/%	均值
狐	52	12.5	24.8	0	22.9	0	19.6
貉	15	-	-	0	11.3	0	15.5
水貂	30	-	-	-	-	0	＜11.3

2.2.2 仔兽细小病毒性肠炎HI抗体(log2) 由表4可见,狐、貉、水貂仔兽肠炎HI母源抗体随着日龄增大而降低,45～50日龄抗体均值仍≥6,高于有效保护值5。

表4 不同品种仔兽细小病毒性肠炎HI抗体检测结果

Table 4. Different varieties of cubs HI antibody of ME

仔兽品种	血样	日龄
35	40	45～50
合格率/%	均值	合格率/%	均值	合格率/%	均值
狐	52	100	7.3	100	7.1	94.7	6.7
貉	15	-	-	66.7	5.0	38.4	7.0
水貂	30	-	-	-	-	65.0	6.0

2.3 仔兽免疫后抗体

2.3.1 健康仔兽免疫后犬瘟热抗体由表5可见,健康兽免疫犬瘟热疫苗后中和抗体产生较快,15 d以上抗体合格率≥93.3%,均值＞210,狐、貉对犬瘟热活疫苗免疫效果比水貂好。综合结果看,免疫后60 d,抗体合格率≥94.7%,均值≥226.9。

表5 健康仔兽免疫后犬瘟热抗体检测结果

Table 5. Health cubs immune antibody of CD

免疫时间/d	狐	貉	水貂
血样数	合格率/%	均值	血样数	合格率/%	均值	血样数	合格率/%	均值
15	25	100	218.5	18	94.4	362.0	75	93.3	212.9
30	70	97.1	238.6	46	97.8	236.1	67	94.0	259.8
60	66	100	223.6	35	100	258.4	186	96.8	265.5
合计	161	99.0	226.9	99	97.4	285.5	328	94.7	246.1

2.3.2 仔兽免疫后细小病毒性肠炎抗体由表6可见,161份狐血样抗体合格率达99.5%,HI抗体均值为7.02；貉免疫疫苗15 d后,抗体合格率≥95.6%,抗体均值≥7.5,能达到免疫效果。水貂抗体合格率较低,77.6%以上,抗体均值5.12以上,勉强合格。

表6 健康仔兽免疫后细小病毒性肠炎HI抗体检测结果

Table 6. Health cubs immune HI antibody of ME

免疫时间/d	狐	貉	水貂
血样数	合格率/%	均值	血样数	合格率/%	均值	血样数	合格率/%	均值
15	25	100	7.25	18	100	7.50	75	78.67	5.12
30	70	98.6	6.68	46	95.6	8.95	67	77.60	5.90
60	66	100	7.14	35	100	8.86	186	78.49	6.54
合计	161	99.5	7.02	99	98.5	8.43	328	78.30	5.85

3 小结及讨论

1) 母兽抗体检测结果显示,断奶后母兽犬瘟热、细小病毒性肠炎抗体合格率均在79%以上,犬瘟热反应抗体均值合计为91.6,肠炎HI抗体均值合计为10.4,母兽抗体值高,保护效果好,不但可以保护自身不发病,也可以为仔兽提供合格母源抗体。不同品种动物抗体值比较,抗体均值有差异,蓝狐犬瘟热抗体均值最高,达110.5,其次是貉，而水貂最低,均值仅为77.8；而细小病毒性肠炎HI抗体水貂最高,达12.5,貉次之,而狐最低,仅为9.25。这也证明了明狐、貉、貂对犬瘟热及细小病毒性肠炎疫苗免疫敏感性不同。

2) 仔兽抗体检测结果显示，仔兽抗体随日龄增大母源抗体均值、合格率均呈下降趋势，犬瘟热抗体下降比较快,35日龄仔狐抗体均值仅为24.8,合格率为12.5%,40～50日龄仔兽抗体合格率均为0,均值为19.6,远低于50的有效保护值,不能提供有效保护;45～50日龄貉、水貂母源抗体,也均处于保护值以下,需要及时免疫犬瘟热疫苗;不同实验室犬瘟热SN抗体有效保护界线有不同的界定,文献显示最低是1∶25,高的1∶100[8-11],从齐鲁动物保健品有限公司研究所毛皮苗实验室多年检测经验及临床应用来看,笔者更倾向于1∶50。肠炎HI抗体消减稍慢,50日龄抗体均值及合格率都较高,有效保护值仍然≥5,可适时免疫。

3) 从仔兽母源抗体检测结果看,犬瘟热、肠炎母源抗体消长不同步,犬瘟热抗体消减快，适宜早免疫,肠炎抗体消减慢,适宜稍晚免疫（灭活疫苗受母源抗体影响小，可以考虑与犬瘟热同时免疫）。另外,不同动物品种、不同配种时间、不同断奶时间,免疫空白期不同,所以,传统的“一刀切”式免疫程序对当前养殖来说是不适宜的,宜按日龄适时进行免疫。根据母源抗体消长情况,建议狐、貉40～45日龄进行首次免疫,水貂50日龄左右进行疫苗首次免疫，与王廷鸿等[1]研究结果相同。

4) 仔兽免疫后,健康动物犬瘟热中和抗体产生较好,均值≥226.9,合格率≥94.7%；狐、貉肠炎HI抗体均值≥7.02,合格率也≥98.5%,可为动物提供良好保护；水貂HI抗体均值仅为5.85,合格率仅为78.3%,这与以往检测结果不同,往年水貂细小病毒性肠炎的抗体均值及合格率要好于狐、貉,通过了解得知,这与2016年水貂行情差,部分养殖场仅免疫了犬瘟热活疫苗、未免疫细小病毒性肠炎灭活疫苗有关。

5) 通过对健康动物免疫后抗体检测结果可以看出,适时、正确疫苗免疫可以产生良好保护效果。通过抗体检测可以了解动物的免疫状态,用于指导生产,有现实意义。

齐鲁动物保健品有限公司

2016年夏季毛皮动物犬瘟热及细小病毒性肠炎抗体检测报告

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