猪病诊断技术的正确“打开”姿势将会是怎么样呢�

《农财宝典》新牧网记� 陈有柎�/p>

在疫病愈加复杂的时期，无论是对于疾病的防控还是治疗，诊断都是一个不可缺少的流程。在�?7届广东畜牧兽医科技大会上，华中农业大学动物医学院教授何启盖分享《猪病诊断技术的应用及正确解读》主题报告、�/p>

何启盖指出，完整的猪病诊断流程首先是临床观察与流行病学调查，提出假设的病因；然后，通过实验室检测抗体和病原，进一步验证假设；最后是确诊，可以进行：病例复制（科赫法则）; 结合临床症状和病理学分析；治疗性诊断（一定要结合药敏试验）、�/p>

可通过病理、血清和病原学诊断检浊�/strong>

对于常用的诊断技术，何启盖介绍，一是现场流行病学调查与诊断技术，包括�?、病例对照研究；2、队列研究；3、类症鉴别诊断：根据疾病之间不同的流行病学特征（发病季节发病日龄）、临床症状、病理变化的差异，采用排除法�?、设计调查表、�/p>

二是实验室诊断技术，分为病理学、血清学和病原学诊断检测技术。病理学诊断技术有病理切片 HE 染色：通过常规切片和冰冻切片等两种方式制备切片；以及分析病变特征（水泡变性、充血出血、梗死等）。前者用于病变观察，后者用于荧光抗体染色等快速诊断。以及免疫组化技术：病原（抗原）在组织中的分布。优质抗体和去除内源性酶的干扰是关键、�/p>

病原学检测可进行病原分离鉴定，包括：1、细菌分离（厌氧、需氧菌、难培养的细菌；抗生素或营养缺陷型选择性培养基）；2、病毒分离鉴定：有病变和无病变的病毒；不同毒株适应不同细胞� 3、其他分离方法：鸡胚尿囊腔（或卵黄囊、绒毛尿囊膜）接种分离；4、实验动物接种：家兔、小鼠等、�/p>

靶基因的保守性会影响PCR诊断敏感�?/strong>

在使用试剂盒进行诊断时，何启盖指出，可以通过以下方面来评价，比如敏感性：从目标群体中检出感染动物（≠发病动物）；特异性：区分感染和非感染动物；稳定性：批间变异系数低于 10%、�/p>

有些因素会影响到诊断方法的的敏感度，比如抗体检� ELISA是靶蛋白的保守性、纯度；抗原检� ELISA是捕获抗体和检测抗体的亲和力；PCR是靶基因的保守性；以及上述方法的检测程序的优化。与稳定性有关的因素是抗原和试剂的稳定性、�/p>

了解诊断的要领后，还需正确应用与分析诊断结果，何启盖指出，诊断方法的组合有串联或并联（平行）试验，是指两种或两种以上的诊断方法的配合应用和诊断结果的采用方式。串联试验能提高诊断的特异性；平行试验能提高诊断的敏感性。具体选择哪种试验，可根据疾病的造成损失的严重程度而定、�/p>

诊断技术前景广阔，应用将更简侾�/strong>

疫病的繁杂也促进了诊断方法的升级，对于发展趋势，何启盖认为会更加快速、简便、可现场使用；可视化、定量化，与免疫评估相关；以及高通量。他介绍了建� IFN-γ-ELISpot 方法来评价猪伪狂犬病疫苗免疫效果。通过PRV IFN-γ-ELISpot 方法与抗体检测、攻毒保护结合，评价伪狂犬疫苗免疫程序。结果证明，弱毒疫苗与灭活疫苗组合，能产生高水平的体液免疫和细胞免疫，提供最强的保护力、�/p>

何启盖现场还展示了一个案例来说明诊断技术的应用：某规模化猪场新的案例发病情况：140 日龄�?0多头达到40.5C以上。对于诊断的流程，何启盖表示，先进行发病日龄调查，发现是生长育肥猪多发，而且急性死亡，口鼻流血，肺脏粘连、�/p>

然后再进行细菌鉴定，使用ApxIV-PCR + ApxI/II/III-PCR 的方法，确定强弱毒和血清。他指出，ApxIV-ELISA 鉴别诊断试剂盒能区分灭活疫苗免疫猪与自然感染猪；区分 ApxIV 基因缺失活疫苗、亚单位疫苗与野毒感染猪；是启动猪传染性胸膜肺炎的净化方法（加拿大种猪是传染性胸膜肺炎阴性）、�/p>

经过一系列的诊断，何启盖给出的处置是发病群体饮水给药；未发病或受威胁群体进行血清特异性疫苗免疫；并消除可能的诱因，如温度与通风、�/p>

本届大会主办单位９�/strong>

广东省畜牧兽医学伙�/p>

承办单位９�/strong>

南方农村报、农财宝典、新牧网＋�/p>

中牧集团＋�/p>

人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室、�/p>

铂金赞助单位９�/strong>

默沙东动物保健品（上海）有限公司�?/p>

广州市华南农大生物药品有限公司�

金河生物科技股份有限公司：�/p>

晚宴一等奖赞助９�/strong>

鹤山市墟岗黄畜牧有限公司：�/p>

金牌赞助单位９�/strong>

佛山市正典生物技术有限公司�?/p>

广州悦洋生物技术有限公司�?/p>

成都微瑞生物科技有限公司�?/p>

深圳市绿诗源生物技术有限公司�?/p>

罗氏诊断产品（上海）有限公司�?/p>

广东旺大集团股份有限公司�?/p>

帝肯（上海）贸易有限公司�?/p>

广东省动物防疫物资储备中心�?/p>

勃林格殷格翰中国动物保健�?/p>

广东永顺生物制药股份有限公司�?/p>

广州维伯鑫生物科技有限公司：�/p>

晚宴特别鸣谢９�/strong>

广东温氏大华农生物科技有限公司

白酒赞助９�/strong>

广东永顺生物制药股份有限公司：�/p>

红酒赞助:

四川华神兽用生物制品有限公司、�/p>