猪传染性胸膜肺炎病原分离鉴定及防治试验

河南某猪场，在育肥猪中，发生了以体温升高、呼吸困难、具有肺炎和胸膜炎典型症状和病变的传染病，笔者进行了病原分离鉴定，并在猪场进行了防治试验，报告如下�?

1 材料与方泔�/p>

1.1 病料来源严重病变的猪肺脏、淋巴结、�/p>

1.2 主要培养基特制的牛心浸汁琼脂平板（含10％灭能的马血清及100 μg/ml NAD）、特制的牛心浸汁液体培养基（�?0％灭能的马血清及100 μg/ml NAD）、微量生化发酵管等�?

1.3 标准金黄色葡萄球菌菌株金黄色葡萄球菌（ATCC25923）购自中国兽医药品监察所、�/p>

1.4 细菌的分离培养将病科接种于特制的牛心浸汁琼脂平板，置烛缸内， 37℃培�?4h，观察培养结果�?

1.5 分离菌株特性检� (1)取纯培养的菌落，涂片作常规革兰氏染色镜检�?2)在一系列生化培养基中加入NAD，接入浓厚待检菌，37℃培�?8 h，观察结果�?3)用不加NAD和马血清的牛心浸汁琼脂平板，将待检物均匀涂布于琼脂面上，用能够产生生长因子的金黄色葡萄球菌ATCC25923菌株培养物划线接种，37℃培养过夜，观察卫星生长现象�?4)在加NAD的牛心浸汁琼脂培养基中加�?％脱纤绵羊血制成平板，接种培养物后经37℃培�?8 h，观察溶血情况�?5)将分离菌株制成菌悬液，给3�?8�?0 g小鼠分别腹腔注射0.3 ml(约含5亿活�?，另2只腹腔注射生理盐水作对照，观察发病情�?周，并从死亡鼠肝脏分离细菌并鉴定、�/p>

1.6 药敏试验将菌落用灭菌生理盐水洗脱，取0.2ml在特制的牛心浸汁琼脂平板上均匀涂布，选用氟苯尼考、强力霉素、恩诺沙星、青霉素、丁胺卡那霉素、环丙沙星、泰乐菌素七种药敏纸片均匀贴在平板上，�?7℃培�?4 h，观察抑菌环大小�?

1.7 疫苗研制 (1)用分离菌种接种于特制的牛心浸汁液体培养基�?7�?00 r/min的摇床震荡培养过夜，使菌液的含菌量为5.0×109�?ml，加�?.2％的福尔马林充分混匀�?7℃灭�?8h，加适量Tween80成水相�?2)�?0号白油，Span80、硬脂酸铝按一定比例混合，15磅�?0min高压灭菌即为油相，将油相加入高速组织捣碎机，然后缓慢加入一定量的细菌液，乳�?min，分装加塞、压铝盖，并对该油乳剂苗进行无菌检验、安全检验等�?

1.8 自家血清制备用已康复的病猪，屠宰时无菌操作采集血清，将血清进行灭活细菌、病毒脱毒处理，并做无菌检验和动物试验、�/p>

1.9 防治试验 (1)取发病猪 40头（5日龄），随机分为2组，�?组用氟苯尼�?0 mg/kg 体重肌肉注射�?�?次，连用5天，同时在发病时注射自家血�?0 ml/头，�?组用氟苯尼�?0mg/kg体重肌肉注射�?�?次，连用5天，观察治疗效果1周�?2)取上述发病猪场的15日龄乳猪90头，随机分为3组，�?组为油乳剂灭活苗免疫组，�?5日龄�? ml/�?�?5日龄�?ml/头，颈部深部肌肉注射。第2组为药物预防组，25日龄时用氟苯尼�?5mg/kg 饲料浓度拌料，连�?周，�?组为空白对照组，对试验猪按常规进行猪瘟、猪链球菌病、猪伪狂犬病免疫�?5日龄断奶，并定期消毒，连续观�?0天，及时记录各组发病情况和临床表现、�/p>

2 结果

2.1 细菌的分离培养见�?�?.5 mm，圆形、中间凸起、边缘整齐、灰白色半透明黏液型菌落�?

2.2 形态学检查分离菌�?4 h培养物为革兰氏染色阴性，两极着染略深的小球杆菌�?

2.3 生化试验结果该分离菌株对葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和果糖发酵产酸，尿素酶试验阳性反应呈粉红色，可在浓厚菌接种后8min出现，随后越来越明显�?

2.4 卫星生长现象在ATCC 25923生长线附近生长较好，离线越远生长越差�?

2.5 溶血试验该分离菌株为典型的β溶血�?

2.6 小鼠致死试验小鼠均在接种�?8 h发病�?0 h左右死亡1只，从死鼠肝脏中分离到较纯的APP，余者观察结束后全部康复�?

2.7 药敏试验结果高度敏感的有氟苯尼考、强力霉素；中度敏感的有丁胺卡那霉素、泰乐菌素；低敏感的有恩诺沙星、环丙沙星、青霉素�?

2.8 油乳剂灭活菌研制及自家血清制备该油乳剂灭活苗经无菌检验、安全检验均正常，该自家血清经无菌检验和动物试验均正常�?

2.9 防治试验 (1)�?组同时使用氟苯尼考和高免血清治疗，1周后还有1头猪有呼吸道症状，剖检见有肺炎和胸膜炎病变�?9头猪痊愈，治愈率�?5％，�?组使用氟苯尼考，1周后还有4头猪有呼吸道症状，剖检见有肺炎和胸膜炎病变�?6头猪痊愈，治愈率�?0％�?2)预防试验：第1组使用疫苗免疫后60天，猪只正常，第2组使用药物预防后，在60天内，共�?头猪出现呼吸道症状，剖检后可见肺炎和胸膜炎病变，发病率为10％；�?组对照，�?0天后，共�?头猪出现呼吸道症状，剖检后可见肺炎和胸膜炎病变，发病率为20％�?

3 讨论与小绒�/p>

3.1 该猪场此次发生的传染病，根据流行病学、临床症状、剖检变化结合病原分离、生化试验、卫星生长现象、溶血试验、动物试验确诊为胸膜肺炎放线杆菌感染�?

3.2 试验结果表明，猪场发病后，使用自家血清同时配合敏感抗生素，治疗效果良好，在进行免疫预防时，使用自家油乳剂灭活苗预防效果良好，单纯采用抗生素预防和治疗效果均不甚理想、�/p>

3.3 该病主要通过空气传播，合理调节饲养密度，搞好猪舍环境卫生，保持良好的通风和适宜的温度，也是预防猪传染性胸膜肺炎发生的重要因素、�/p>

河南某猪场，在育肥猪中，发生了以体温升高、呼吸困难、具有肺炎和胸膜炎典型症状和病变的传染病，笔者进行了病原分离鉴定，并在猪场进行了防治试验，报告如下�?1 材料与方

2016-11-29 04:40:41