长期饲喂高锌日粮对断奶仔猪免疫机能的影响

摘　要：试验选用60�?3日龄��1日龄临床检查健康的���?times;�?times;�?rdquo;三元杂交断奶仔猪，按体重和性别随机分成3组，每组20头，分别饲喂基础日粮、基础日粮�? 000 mg/kg氧化锌、基础日粮�?00 mg/kg蛋氨酸锌，测定断奶仔猪免疫机能的变化。结果显示，在断奶后0 d�?1 d饲喂高锌日粮能显著提高仔猪白细胞吞噬率和T淋巴细胞转化率，增加血清免疫球蛋白水平；而在断奶�?2 d�?0 d，仔猪白细胞吞噬率、T淋巴细胞转化和血清IgG、IgA水平显著下降、�br /> 关键词：高锌日粮；长期饲喂；断奶仔猪；免疫机胼�br /> �?Zn)作为动物体内一种重要的微量元素，是免疫器官生长发育和免疫应答所必需的营养因子，能激活胸腺素，提高机体的免疫应答，增强T淋巴细胞的功能，对免疫细胞的凋亡有调节作用[1]。在日粮中添�? 000 mg/kg�? 000 mg/kg氧化锌或200 mg/kg�?00 mg/kg蛋氨酸锌，可显著降低断奶仔猪腹泻的发病率，减少断奶应激，提高日增重，改善饲料报酬，增强抵抗力，促进断奶仔猪生长[2]。因此，锌作为一种有效的饲料添加剂被广泛地应用在养猪"养猪业。锌是维持人和动物正常生理功能和生化代谢所必需的微量元素，但长期饲喂过量的锌又会影响到机体免疫器官的生长发育，抑制免疫球蛋白的含量及补体的级联放大，降低机体免疫力[3]。目前，有关高锌对断奶仔猪免疫调节作用的报道较多，但对高锌长期应用的免疫安全性的研究很少。本试验旨在研究长期饲喂高锌日粮对断奶仔猪免疫机能的影响，进一步探讨高锌对断奶仔猪的毒副作用，为临床锌源饲料的合理使用提供科学依据、�br /> 1　材料与方泔�br /> 1.1　试验材料
氧化�?Zn含量��75%，饲料级)购自市场，蛋氨酸�?Zn含量��17%，营养添加剂�?购自上海绿源精细化工厂。基础日粮参照美国NRC (1998)仔猪营养需要配制。试验组仔猪日粮为在基础日粮之上添加3 000 mg/kg的氧化锌(ZnO)�?00 mg/kg的蛋氨酸�?ZnMet)，以逐级放大混匀的方法充分混合、称重、装袋，标记，储存在通风干燥处备用、�br /> 1.2　试验用动物的选择分组及饲养管琅�br /> �?0�?3日龄��1日龄��杜长�?rdquo;三元杂交断奶仔猪中随机选择临床检查健康的60头仔猪，并按体重和性别分成3组，每组20头，进行编号。仔猪从7日龄开始诱食，23日龄断奶。Ⅰ�?对照�?仔猪饲喂基础日粮，Ⅱ组和Ⅲ组仔猪分别饲喂基础日粮�? 000 mg/kg 氧化锌和基础日粮�?00 mg/kg蛋氨酸锌，试验期�?0 d。试验仔猪采取群饲，自由采食，自由饮水，免疫消毒程序按猪�?quot; 猪场常规方法进行、�br /> 1.3　测试指标及方泔�br /> 1.3.1　样品采集及处理　每组随机选择10头仔猪，分别在断奶后的第0天�?1天�?2天和70天，每天上午7�?0�?�?0，前腔静脉采血5 mL，待凝血后，3 000 r/min离心15 min，分离血清，储存�? ℃冰箱，用于检测仔猪血清中IgA、IgM、IgG含量；另采取2 mL抗凝血，用于检测白细胞吞噬率和T淋巴细胞转化率、�br /> 1.3.2　免疫器官指数的测定　仔猪在处死前进行称重，处死后取免疫器官称量，计算免疫器官的指数。免疫器官指数＝免疫器官的重�?g)/体重(g)��100%、�br /> 1.3.3　白细胞吞噬率的测定　取抗凝血50 ��L，放入培养管中，加入葡萄球菌菌液50 ��L，充分混匀。在37 ℃温箱中培养30 min，其间，每隔10 min摇匀一次。作用完毕后，取1滴于洁净玻片上，推成薄片，姬姆萨瑞氏复合染色液染色，油镜观察。顺序计�?00个细胞，分别记录吞噬和未吞噬的白细胞数，并计算出吞噬率、�br /> 1.3.4　T淋巴细胞转化率的测定　用无菌吸管吸取肝素抗凝血0.1 mL加至淋巴细胞转化管中，用橡皮塞塞紧管口，摇匀，置37 ℃、体积分数为5% CO2培养箱中培养72 h，其间，每天振摇2次。终止培养后，上下分层，弃上清液，取沉淀物涂片，姬姆�?shy;瑞氏复合染色液染色镜检，记�?00个T淋巴细胞，并计算其中转化细胞的百分率[7]、�br /> 1.3.5　血清IgG、IgA和IgM的水平　血清中IgG、IgA和IgM的测定，均采用上海复星长征医学科学有限公司生产的免疫球蛋白A、M、G试剂盒，用自动生化分析仪检测、�br /> 1.4　数据处理
试验数据均以 ��SD表示，采用SAS 9.0统计软件中的交叉分组两因素方差分析过程进行方差分析，多重比较采用Duncan��s法、�br /> 2　结果
2.1　断奶仔猪免疫器官指数的比辂�br /> 由表1可见，试验Ⅱ组和Ⅲ组仔猪脾脏和胸腺指数均极显著地高于对照�?P<0.01)；Ⅱ组和Ⅲ组之间脾脏指数有显著差�?P<0.05)，而胸腺指数差异不显著(P>0.05)、�br /> �?　3组仔猪免疫器官指�?br /> Table 1　The comparison of immune organ indexes in three groups of piglets
项目
Items � 练�br /> Group� � 练�br /> Group � � 练�br /> Group Ⅱ�br /> 脾脏指数/%
Spleen index 0.145 4��0.004 7A 0.173 6��0.027 6Ba 0.194 4��0.016 6Bb
胸腺指数/%
Thymus index 0.139 0��0.008 5A 0.187 4��0.011 3B 0.201 4��0.018 4B

注：同一行比较，上标字母相同或不标者表示差异不显著(P>0.05)，小写字母不同者表示差异显�?P<0.05)，大写字母不同者表示差异极显著(P<0.01)、�br /> Note：The data with the same or no superscript letters in a row indicate no significant difference(P>0.05)，the data with different superscripts of small letters indicate significant difference at 0.05 level，the data with different superscripts of capital letters indicate significant difference at 0.01 level.
2.2　断奶仔猪白细胞吞噬率的比辂�br /> 由表2可见，与断奶时相比，在断奶后21 d，对照组仔猪白细胞吞噬率极显著降�?P<0.01)，至断奶�?2 d又恢复到断奶时水平。在断奶�?1 d，Ⅱ组和Ⅲ组仔猪的白细胞吞噬率显著地高于断奶时水�?P<0.05)，而在断奶�?2 d�?0 d均极显著降低(P<0.01)。组间比较，在断奶后21 d，对照组仔猪白细胞吞噬率分别低于Ⅱ组、Ⅲ�?4.33%(P<0.01)�?5.30%(P<0.01)，Ⅱ组和Ⅲ组间差异不显著；在断奶�?2 d�?0 d，对照组仔猪白细胞吞噬率分别高于Ⅱ组、Ⅲ�?8.48%(P<0.05)�?3.28%(P<0.01)�?6.15%(P<0.01)�?8.20%(P<0.01)，Ⅱ组高于Ⅲ�?0.93%(P<0.05)�?5.08%(P<0.05)、�br /> �?　3组仔猪白细胞吞噬玆�br /> Table 2　The comparison of white blood cell phagocytosis rates in three groups of piglets%
断奶后天�?d
Days after weanling � 练�br /> Group� � 练�br /> Group � � 练�br /> Group Ⅱ�br /> 0 0.512 0��0.059A 0.506 5��0.036Aa 0.507 5��0.025Aa
21 0.395 0��0.025B 0.601 5��0.041Ab 0.610 5��0.048Ab
42 0.506 5��0.058A 0.427 5��0.025B 0.353 5��0.043B
70 0.513 0��0.025A 0.351 0��0.019B 0.305 0��0.021B

注：同一列比较，上标字母相同或不标者表示差异不显著(P>0.05)，小写字母不同者表示差异显�?P<0.05)，大写字母不同者表示差异极显著(P<0.01)、�br /> Note：The data with the same or no superscript letters in a column indicate no significant difference(P>0.05)，the data with different superscripts of small letters indicate significant difference at 0.05 level，the data with different superscripts of capital letters indicate significant difference at 0.01 level.
2.3　断奶仔猪T淋巴细胞转化率的比较
由表3可见，与断奶时相比，对照组仔猪T淋巴细胞转化率在断奶�?1 d显著下降(P<0.05)，在断奶�?2 d�?0 d极显著升�?P<0.01)；Ⅱ组、Ⅲ组仔猪T淋巴细胞转化率在断奶�?1 d显著升高(P<0.05)，而在断奶�?0 d却极显著降低(P<0.01)。与对照组相比，在断奶后21 d，Ⅱ组、Ⅲ仔猪T淋巴细胞转化率分别提�?0.35%(P<0.01)�?3.08%(P<0.01)；断奶后42 d，分别降�?4.22%(P<0.05)�?6.30%(P<0.05)；在断奶�?0 d，分别降�?9.72%(P<0.01)�?1.27%(P<0.01)。在整个试验过程中，Ⅱ组、Ⅲ组仔猪T淋巴细胞转化率无显著差异(P>0.05)、�br /> �?　3组断奶仔猪T淋巴细胞转化玆�br /> Table 3　The comparison of Tlymphocyte transformation rates in three groups of piglets%
断奶后天�?d
After weanling � 练�br /> Group� � 练�br /> Group � � 练�br /> Group Ⅱ�br /> T0 0.629 0��0.02106Aa 0.638 0��0.024 97Aa 0.635 0��0.021 98Aa
21 0.530 5��0.020 06Ab 0.691 5��0.020 28Ab 0.706 0��0.015 60Ab
42 0.721 0��0.020 66B 0.618 5��0.014 73Aa 0.603 5��0.014 15Aa
70 0.743 5��0.021 09B 0.522 5��0.023 36B 0.511 0��0.019 26B

注：同一行比较，上标字母相同或不标者表示差异不显著(P>0.05)，小写字母不同者表示差异显�?P<0.05)，大写字母不同者表示差异极显著(P<0.01)、�br /> Note：The data with the same or no superscript letters in a row indicate no significant difference(P>0.05)，the data with different superscripts of small letters indicate significant difference at 0.05 level，the data with different superscripts of capital letters indicate significant difference at 0.01 level.
2.4　断奶仔猪血清IgG，、IgA和IgM的水平的比较
从表4可看出，与断奶时相比，断奶后21 d，Ⅰ组、Ⅱ组仔猪血清中IgG、IgA水平极显著降�?P<0.01)，IgM水平没有显著变化(P>0.05)，而Ⅲ组仔猪血清IgG、IgA和IgM水平均没有显著变化。与断奶�?1 d相比，在断奶后的42 d�?0 d，Ⅰ组仔猪血清中gG、IgA和IgM水平均极显著的升�?P<0.01)，Ⅱ组、Ⅲ组仔猪血清中IgG和IgA水平极显著的降低(P<0.01)，IgM水平没有显著变化(P>0.05)。组间比较，在断奶后21 d，Ⅱ组、Ⅲ组仔猪血清中IgG水平分别比Ⅰ组提�?3.39%(P>0.05)�?2.14%(P<0.01)，IgA水平分别提高11.11%(P>0.05)�?0.86%(P<0.01)，IgM水平分别提高18.57%(P<0.01)�?0.48%(P<0.05)；在断奶�?2 d，Ⅱ、Ⅲ组仔猪血清中IgG水平分别比Ⅰ组降�?2.60%(P<0.01)�?5.65%(P<0.01)，IgA水平分别降低27.35%(P<0.01)�?9.91%(P<0.01)，IgM水平分别降低8.37%(P>0.05)�?1.41%(P<0.05)；在断奶�?0 d，Ⅱ、Ⅲ组仔猪血清中IgG水平分别比Ⅰ组降�?5.48%(P<0.01)�?7.62%(P<0.01)，IgA水平比Ⅰ组分别降低了36.89%(P<0.01)�?5.25%(P<0.01)，IgM水平比Ⅰ组分别降低了17.19%(P<0.01)�?2.46%(P<0.01)、�br /> �?　3组仔猪免疫球蛋白水平
Table 4　The comparison of immunoglobulin levels in three groups of piglets
项目
Items 断奶后天�?d
Days after weanling � 练�br /> Group� � 练�br /> Group � � 练�br /> Group Ⅱ�br /> IgG/(g��L�?) 0 0.330��0.091 8A 0.339��0.030 0A 0.335��0.073 2A
21 0.224��0.017 1B 0.254��0.020 1B 0.296��0.052 1A
42 0.331��0.033 1A 0.190��0.049 4C 0.213��0.043 2B
70 0.420��0.037 1 C 0.187��0.040 6C 0.220��0.037 1B
IgA/(g��L�?) 0 0.114��0.018 4A 0.118��0.016 2A 0.120��0.025 8A
21 0.081��0.007 4B 0.090��0.006 7B 0.106��0.013 5A
42 0.117��0.014 9A 0.085��0.005 3B 0.082��0.010 3B
70 0.122��0.021 5A 0.077��0.008 2B 0.079��0.008 2B
IgM/(g��L�?) 0 0.230��0.028 3A 0.246��0.027 2 0.241��0.026 9
21 0.210��0.020 0A 0.249��0.012 0 0.232��0.023 0
42 0.263��0.021 6B 0.241��0.019 1 0.233��0.032 0
70 0.285��0.024 6B 0.236��0.024 1 0.221��0.027 7

注：同一行比较，上标字母相同或不标者表示差异不显著(P>0.05)，小写字母不同者表示差异显�?P<0.05)，大写字母不同者表示差异极显著(P<0.01)、�br /> Note：The data with the same or no superscript letters in a row indicate no significant difference (P>0.05)，the data with different superscripts of small letters indicate significant difference at 0.05 level，the data with different superscripts of capital letters indicate significant difference at 0.01 level.
3　讨论
3.1　长期饲喂高锌日粮对断奶仔猪免疫器官指数的影响
锌对于维持动物中枢免疫器官和外周免疫器官的结构和功能起着重要作用，动物机体通过补锌可以显著改善其免疫器官生长发育，但长时间高剂量补锌则抑制其生长发育。吴嘉惠等[4]采用高于正常锌量10倍的高锌饲料喂养大鼠4周后，发现大鼠的胸腺发育明显受到抑制；吴水冰[5]在研究高锌大鼠的免疫功能时也得出相应的结论，当大鼠摄入高出正常剂量的10倍的锌后，大鼠就会出现生理紊乱、胸腺重量减轻等现象、�br /> 本试验研究发现，长期饲喂高锌日粮，仔猪脾脏和胸腺指数都极显著的高于对照组，这可能是由于饲喂高锌日粮前期能促进脾脏和胸腺的生长发育，而到后期中毒时造成胸腺、脾脏细胞增生肥大，引起胸腺和脾脏肿大所致。具体原因有待于进一步研究、�br /> 3.2　长期饲喂高锌日粮对断奶仔猪白细胞吞噬率及T淋巴细胞转化率的影响
锌与巨噬细胞之间可以相互结合，从而改变膜的稳定性和组氨酸的释放，有利于巨噬细胞的吞噬与杀伤作用。在本试验前期，试验组仔猪白细胞吞噬率极显著高于对照组，这与前人报道一致[68]。另有报道，日粮中添�? 500 mg/kg�?氧化锌形�?对断奶仔猪血液中中性粒细胞功能无影响[9]，添加高锌并不改变血细胞总数或细胞免疫功能[10]。这些互相矛盾的结果可能与锌源、动物的生理状态和体内锌的含量等有关。在本试验的后期，由于长时间的饲喂高锌日粮，试验组仔猪白细胞吞噬率极显著的低于对照组。Wu J H等[11]也发现，大鼠饲料中添�? 000 mg/kg�?中毒剂量)会使外周血白细胞总数和白细胞吞噬率极显著地低于对照组、�br /> 锌作为一种非特异性有丝分裂原，在一定剂量下，对PHA促进淋巴细胞的增殖能力有协同作用[12]。国内外大多研究表明[1315]，补锌可明显提高动物机体T淋巴细胞转化率。在本试验中，断奶后21 d，由于断奶应激作用，对照组仔猪淋巴细胞转化率极显著下降，试验组由于高锌的添加而升高。在本试验的后期，试验组仔猪淋巴细胞转化率与对照组相比极显著地降低，表明适量补锌能提高T淋巴细胞转化率，进而提高仔猪的免疫机能，而大剂量长期饲喂，则对断奶仔猪产生毒害作用，抑制了仔猪的免疫功能，使淋巴细胞转化率降低。方静等[16]研究得出同样结论，锌中毒能极显著的降低T淋巴细胞的活性、�br /> 3.3　长期饲喂高锌日粮对断奶仔猪血清免疫球蛋白的影哌�br /> 免疫球蛋白是动物受抗原刺激后体内产生的能与抗原特异性相互作用的一类球蛋白。免疫球蛋白普遍存在于血液、组织液及分泌液中。许多研究表明[1720]，高锌可以提高动物免疫球蛋白水平，增强机体免疫功能。不同锌水平对仔猪血清免疫球蛋白有不同的作用，冷静等[3]研究发现，日粮中添加适量的锌( 1 000 mg/kg)能显著提高仔猪免疫球蛋白及补体含量，�? 000 mg/kg日粮锌对补体有显著抑制作用，5 000 mg/kg日粮锌对仔猪免疫球蛋白和补体含量有显著抑制作用、�br /> 本试验发现，添加高锌日粮能抑制断奶后21 d内仔猪血清免疫球蛋白水平的降低，有效地缓解断奶应激，但是长期大剂量饲喂高锌日粮使血清IgG、IgA水平显著下降，对仔猪产生免疫抑制作用。但也有研究表明[21]，仔猪的体液免疫反应不受锌源的影响，这可能与动物本身的免疫状态、选择的指标等因素有关、�/span>

断奶仔猪科学营养的管理，科学的营养与饲料的区别就在仔猪的健康

摘　要：试验选用60�?3日龄±1日龄临床检查健康的�?amp;times;�?amp;times;大三元杂交断奶仔猪，按体重和性别随机分成3组，每组20头，分别饲喂基础日粮、基础日粮�? 000 mg/kg氧化锌、基础日粮�?00 mg/kg�?..

2019-10-31 08:01:00

摘　要：试验选用60�?3日龄±1日龄临床检查健康的�?amp;times;�?amp;times;大三元杂交断奶仔猪，按体重和性别随机分成3组，每组20头，分别饲喂基础日粮、基础日粮�? 000 mg/kg氧化锌、基础日粮�?00 mg/kg�?..

2019-10-29 08:30:38