宋云峰等[4]将ORF2 基因克隆入真核表达载体pCDNA3.1(＋)，构建了pCORF2 作为核酸疫苗免疫小鼠。同时将具有蛋白转导功能的BVP22基因分别克隆到ORF2基因的上游和下游，使二者融合表达，命名为pCORF2BVP22和CBVP22ORF2。分4 组肌肉注射免疫接种Balb/c小鼠，分别注射pCD2NA311(＋)、pCORF2、pCORF2BVP22和pCBVP22ORF2 ，共免疫2次，间隔2周，分别于首免后2周和二免后4周采血，ELISA法检测体液抗体。同时为在体外验证ORF2和BVP22基因的真核表达，将ORF2和BVP22基因分别克隆入pEGFP2N1载体，构建了pNORF2和pNBVP22，转染Hela细胞后在荧光显微镜下观察到了ORF2和BVP22在体外的瞬时高效表达。结果显示，通过两次免疫后，各疫苗组均产生了针对ORF2的体液抗体，同时证明BVP22可增强核酸疫苗的免疫效果，其中以BVP22在ORF2上游效果更好，为防控猪圆环病毒2型感染提供了较为理想的侯选疫苗。

Blanchard P等[5]研究了PCV2基因疫苗及亚单位苗的免疫效力，仔猪用ORF2和GMCSF 表达质粒首免，2周后用ORF2和GMCSF表达质粒以及ORF2蛋白二免，免疫猪可抵抗PCV2的攻击，表明ORF2可诱导机体产生免疫保护。但通过比较，单独用PCV2基因疫苗两次免疫的效果低于亚单位苗的效果，不能完全抑制PCV2的增殖。

3.2　重组疫苗

Zhou J Y等[6]首次在大肠埃希菌中对缺失了核定位信号序列(NLS)的PCV2 Cap蛋白(dCap)与谷胱甘肽S转移酶(GST)进行了融合表达，获得了rGSTdCap蛋白，试验证明，纯化的rGSTdCap蛋白以及去掉GST的rdCap蛋白，均可与抗PCV2猪血清发生特异性反应；用rdCap蛋白制备的单抗，可与感染PK15细胞的病毒粒子以及在PK15细胞中表达的Cap蛋白发生反应，同时表现对PCV2病毒粒子的中和活性。表明rGSTdCap蛋白可以作为潜在的疫苗抗原和血清学诊断试剂。

Fenaux M等[7]应用基因工程方法，构建了PCV1和PCV2相互嵌合的感染性克隆，对其免疫原性和致病性进行了研究，发现将PCV2的ORF2基因克隆进PCV1基因组中，对猪的致病性小于PCV2基因组，并可诱导机体产生PCV2核衣壳蛋白抗体，但是对猪的免疫反应性很弱。随后的试验表明，该减毒的PCV12嵌合感染性克隆可诱导机体产生免疫保护，抵抗PCV2野毒株的攻击。用PCV12免疫后，攻毒猪的病毒血症发生率、淋巴结肿大、淋巴结中PCV2基因组拷贝量、PCV2抗原量、淋巴

组织的病变等方面均显著低于非免疫猪，表明减毒的PCV12 嵌合子可诱导机体产生针对PCV2的保护性免疫反应，有望作为疫苗使用。

3.3　活载体疫苗

Ju C等[8]用减毒的伪狂犬病病毒(PRV)作为活病毒载体，构建了表达PCV2 ORF1ORF2的重组病毒PRVPCV2。试验表明，PRVPCV2可诱导小鼠和猪产生强烈的抗PCV2和PRV抗体反应，在小鼠中产生针对PRV的免疫保护，可抵抗致死量的PRV Ea株的攻击，表明PRVPCV2可用于抵抗PCV2和PRV感染。

Song Y等[9]将PCV2 ORF2基因插入pIECMV质粒，与伪狂犬病毒Tk/gE/LacZ＋基因组共转染IBRS2细胞，产生一个重组的Tk/gE/ORF2(＋)病毒。Western blot和IFA检测结果表明PCV2的ORF2基因得到表达。用该重组病毒免疫4周龄的仔猪，采用PRVELISA，PRV中和试验，ORF2ELISA 和ORF2特异性的淋巴细胞增殖试验等方法检测了PRV Tk/gE/ORF2(＋)的免疫原性。结果表明，PRV Tk/gE/ORF2(＋)诱导了明显的抗PRV 和PCV2体液免疫反应，并且在试验的第49天能够检测到PCV2特异性的淋巴细胞增值反应。上述研究表明重组的PRV Tk/gE/ORF2(＋)可能作为一个潜在的疫苗来预防PCV2和PRV。

Wang X W等[10]用表达PCV2 ORF2的重组腺病毒免疫小鼠，结果表明，所构建的重组腺病毒能够表达ORF2蛋白，能够在小鼠体内诱导抗PCV2免疫反应，对有效预防PCV2相关疾病的感染，重组腺病毒可能是一个比较理想的载体。

总之，PCV2的免疫学及疫苗研究取得了很大进步，开发安全有效的PCV2新型疫苗仍然是今后努力的方向。