猪圆环病毒2型主要引起断奶仔猪多系统衰竭综合征,在包括中国在内的各养猪国家广泛流行,造成严重的经济损失,受到国内外学者的高度重视,对此病的研究特别是对其疫苗的研究正日益受到关注。文章就猪圆环病毒2型的灭活疫苗、弱毒疫苗和基因工程疫苗的研究进展做了详细的阐述。
猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)是断乳仔猪多系统综合征(Postweaning multisystemic wasting syndrome,PMWS)的主要病原,自1991年PMWS在北美最先发现以来,已在世界范围内流行。由于PCV2经常与多种病原混合感染,典型性临床症状有消瘦、皮肤苍白、腹泻、呼吸障碍及轻度的黄疸,还包括神经症状、繁殖障碍、皮炎等。PCV2及其相关的猪病死亡率10%~30%不等,较严重的猪场在暴发本病时死淘率高达40%,给养猪业造成严重的经济损失。文章就PCV2疫苗的研究进展做一综述。
1 PCV灭活疫苗
一种用于经产母猪和初产母猪的含有佐剂的灭活PCV2疫苗,现在已经在商业上应用,并且在一些欧洲国家获得应用许可。该疫苗对PMWS的防控效果需要进一步确定。对断奶仔猪使用试验性PCV2灭活疫苗已经显示出临床效果,但仍需进行进一步的试验。
2 弱毒疫苗
Fenaux M等[1]将PCV2分离株在PK15细胞中连续传至120代,将第1代病毒(PCV2 VP1)基因与传代病毒比较,发现第120代病毒(PCV2 VP120)基因组中发生了2个碱基突变,并且都位于Cap基因内,第一个突变发生于第30代病毒,该突变使核衣壳蛋白中第110 位的脯氨酸变为丙氨酸,并且在以后的传代中一直维持;第二个突变发生于第120代,使Cap蛋白中第191位的精氨酸变为丝氨酸。将PCV2 VP120和PCV2 VP1感染SPF猪进行比较,发现PCV2 VP120 感染后的病毒血症发生率低于PCV2 VP1,同时病毒血症的持续时间短,血清中PCV2基因组拷贝量、眼观病变及组织学病变也较PCV2 VP1感染猪轻,表明体外传代可增强PCV2在细胞中的增殖能力,弱化其致病性,这为研制PCV2疫苗提供了一个新的思路。
3 基因工程疫苗
3.1 核酸疫苗
Kamstrup S等[2]为了进一步探索衣壳蛋白免疫预防的适用性,采用了pcDNA3.1/V5His/TOPO真核表达载体克隆了PCV2的ORF2基因,并证实了此质粒能够在体外(通过直接表达蛋白)以及体内(通过对小鼠用基因枪注射质粒,诱导小鼠免疫产生抗体)进行表达。免疫试验结果表明,所构建的核酸疫苗均能诱导小鼠产生一定的体液免疫和细胞免疫反应。
金宁一等[3]以pVAXⅠ为载体,构建了表达PCV2 ORF1、ORF2和猪IL18的核酸疫苗 pVAXⅠORF2、pVAXⅠIL18ORF2、pVAXⅠORF2ORF1、pVAXⅠIL18ORF2ORF1等。用这些核酸疫苗免疫6周龄~8周龄小鼠,采用ELISA方法检测小鼠血清中的PCV2抗体,用流式细胞仪检测脾CD4+、CD8+T淋巴细胞亚类数量。免疫试验结果表明,所构建的核酸疫苗均能诱导小鼠产生一定的体液免疫和细胞免疫反应,其中核酸疫苗pVAXⅠIL18ORF2ORF1免疫效果优于其他几种疫苗。