干货：十一种在研非洲猪瘟疫苗的比较都有哪些区别？

xiaoz 网络

2019-09-04 15:00:00

【导读】 ...

一、非洲猪瘟的特点

中文名称	非洲猪瘟
病名英文及缩写	African swine fever，ASF
病原英文及缩写	African swine fever virus，ASFV
OIE规定	OIE动物卫生法典要求必须报告的动物疫病
我国规定	我国动物疫病名录一类动物疫病
科属	非洲猪瘟科非洲猪瘟病毒属
病毒类型	双股线状DNA
基因组	基因组长170-190kb（约是经典猪瘟的15倍）
编码基因	编码超过170个蛋白
病毒形态	病毒粒子直径约为200nm左右，20面体，呈现六边型，立体对称，有囊膜和内膜
病毒的生存能力	温度：60℃ 20分钟；56℃ 70分钟25-37 ℃ 数周；4 ℃ >1年；冻肉数年-数十年。pH：4-11.5 无血清；4-13.4 有血清；未熟肉品、腌肉、泔水中可长时间存活非洲猪瘟病毒非洲猪瘟病毒在环境中具有高度抗性，在储藏在4℃的血液中能存活半年至一年；在室温下粪便中能存活11天，在污染的猪圈中至少能存活一个月。在储存在3.9℃的肉类中150天内仍具感染性、在咸干火腿中140天仍具有感染性，在冰冻的尸体中几年之后仍具有感染性。***、氯仿等脂溶剂可破坏囊膜使其失活（非洲猪瘟综合防控技术，吴晓东）
我国首例	2018年8月1日，国家外来动物疫病研究中心接到辽宁省沈阳市沈北区发现 ASF临床可疑病例的报告。随后确诊。
流行历史	1921年，东非国家肯尼亚首次确认非洲猪瘟疫情。之后，于1957年传入欧洲，1971年传入美洲，2007年，首次传播至欧亚接壤的格鲁吉亚，迅速传入俄罗斯，并在高加索地区定殖。2012年，传入乌克兰，2013年传入白俄罗斯。2014年传入波兰、立陶宛、拉脱维亚、爱沙尼亚，2016年传入摩尔多瓦，2017年传入捷克，罗马尼亚。2018年8月传入我国辽宁。
是否人畜共患	不传染人
流行特点	在世界范围广泛流行，发病率及死亡率高，一年四季均可发生
流行毒株	依据B646L/p72基因，本病毒属于基因II型，与目前在俄罗斯和东欧流行的格鲁吉亚毒株（Georgia 2007）同属于一个进化分支，但是临床上极有可能出现新的基因型
易感动物和传播途径	家猪和野猪对非洲猪瘟均易感。各年龄段猪均可感染。软蜱是非洲猪瘟病毒的自然宿主和传播媒介。
分型	超急性型、急性型、亚急性型、慢性型
临床症状和病理变化	临床症状都以发病急、高热稽留、全身泛发性出血为特征；病理变化特征为全身性的脏器出血，有淤血点或斑，脏器充血水肿等。
疑似处理	自检结合政府机关检测。
鉴别诊断	需要与高致病性猪蓝耳病、猪丹毒、沙门氏菌感染、巴氏杆菌感染、猪链球菌感染、钩端螺旋体感染、香豆素抗凝血剂中毒、圆环病毒病（猪皮炎肾病综合征与断奶仔猪多系统衰竭综合征）、副猪嗜血杆菌感染、伪狂犬病、血小板减少性紫癜、华法林中毒、重金属毒性和其他普遍败血症或出血性疾病等进行鉴别诊断。
疫苗研制	全球范围暂无疫苗，只能采取扑杀净化措施
国家防控措施	由于目前在世界范围内没有研发出可以有效预防非洲猪瘟的疫苗，但高温、消毒剂可以有效杀灭病毒，所以做好养殖场生物安全防护是防控非洲猪瘟的关键。一是严格控制人员、车辆和易感动物进入养殖场；进出养殖场及其生产区的人员、车辆、物品要严格落实消毒等措施。二是尽可能封闭饲养生猪，采取隔离防护措施，尽量避免与野猪、钝缘软蜱接触。三是严禁使用泔水或餐余垃圾饲喂生猪。四是积极配合当地动物疫病预防控制机构开展疫病监测排查，特别是发生猪瘟疫苗免疫失败、不明原因死亡等现象，应及时上报当地兽医部门。

干货：十一种在研非洲猪瘟疫苗的比较都有哪些区别？

图. ASFV病毒粒子和基因组结构示意图（吴晓东）

二、非洲猪瘟疫苗开发的一般流程和主要困难

非洲猪瘟疫苗开发的一般流程如下（以减毒活疫苗的研发为例，图片来源于网络）

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非洲猪瘟疫苗开发主要困难（雷建林等2019）

2.1 遗传多样性目前，依据 p72 基因 (B646L) 末端核苷酸的差异，可将 ASFV 分为24 个基因型，基于病毒是否会引起红细胞吸附的特性，已鉴定出至少有 8 个血清群。

2.2 免疫保护机制不清楚

2.3 结构复杂，基因组巨大为170-190kb，功能性蛋白超过两百个

2.4 可选择的入侵方式：ASFV 可通过受体介导的内吞作用或非特异性的巨胞饮作用入侵靶细胞。

2.5免疫逃避：ASFV 主要靶向单核-巨噬细胞系统，通过抑制细胞凋亡、宿主免疫应答等策略逃逸宿主免疫防御系统。

2.6 疫苗开发面临的其它难题：基因缺失疫苗被认为是短期内最有希望开发成功的疫苗，具有同源保护作用，也能抵抗异源毒株的攻击，但存在安全隐患，进一步鉴定及敲除毒力基因后具有很大应用前景然而，该类疫苗在商业化的进程也面临诸多挑战：1) 需建立区别疫苗免疫与野毒感染的 (Differentiating infected from vaccinated animals， DIVA) 诊断方法；2) 需构建病毒稳定表达的细胞系，原代单核-巨噬细胞仅限于实验室对 ASFV 生物特性与免疫原性的研究，不适合用于疫苗批量生产，其它易感细胞传代后病毒容易变异；3) 需建设安全的病毒操作平台， ASFV 致病性、攻毒模型、免疫效力评价需在动物生物安全三级 (ABSL3) 以上实验室进行；4) 安全性及免疫原性评价周期较长，基因缺失疫苗专利申请及兽药证书的审批需要严格评估程序，确保毒株在宿主及环境中安全、遗传稳定，且免疫效力不受影响。

三、十一种在研非洲猪瘟疫苗的比较

1

类型：减毒活疫苗

构建策略：MGF360-505R缺失和CD2v与MGF360-505R联合缺失

基因型：Ⅱ，我国

毒株：Pig/CN/HLJ/2018

构建单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

效果：能提供对非洲猪瘟中国流行强毒株的100％免疫保护，可作为安全和有效的防控中国非洲猪瘟疫情的疫苗，具有极大的社会价值。

研究阶段：截至8月，临床中试

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2

类型：减毒活疫苗

构建策略：CD2v和 MGF 基因

基因型：Ⅱ，我国

毒株：SY18

构建单位：军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所

效果：接种猪能够100%抵抗亲本毒株SY18株的攻击

研究阶段：安全有效评价

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3

类型：亚单位疫苗

构建策略：2018年分离的沈阳毒株CD2v蛋白出发，经剪切优化后，用CHO细胞表达系统表达了重组CD2v蛋白。

基因型：Ⅱ，我国

毒株：SY18

构建单位：青岛易邦生物工程有限公司

效果：本发明的表达非洲猪瘟CD2v蛋白细胞株，表达量高易于纯化，可用于鉴别诊断，为生产非洲猪瘟亚单位疫苗和诊断试剂奠定了坚实的基础。

研究阶段：构建完成，具体不详

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4

类型：亚单位疫苗

构建策略：在SF9细胞中表达非洲猪瘟CD2v蛋白的重组杆状病毒

基因型：Ⅱ，我国

毒株：SY18

构建单位：青岛易邦生物工程有限公司

效果：本发明的表达非洲猪瘟CD2v蛋白细胞株，表达量高易于纯化，可用于鉴别诊断，为生产非洲猪瘟亚单位疫苗和诊断试剂奠定了坚实的基础。

研究阶段：构建完成，具体不详

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5

类型：减毒活疫苗

构建策略：

通过不同的转染质粒构建不同的缺失突变体p72DA224LGUS10T,

p72DA238LGUS10T和 p72DEP153RGAL10T 在COS7细胞系，

以及p72D276RRGAL10T 在PAM细胞系

基因型：I，西班牙

毒株：NH/P68

构建单位：CSIC-UAM

效果：不同的缺失突变体对Arm07毒株有一定程度的保护作用，能够减少临床症状的程度

研究阶段：安全有效评价

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6

类型：减毒活疫苗

构建策略：EP402R基因的单核苷酸缺失造成ORF移吗，提前产生终止密码子

基因型：Ⅱ，西班牙

毒株：Lv17/WB/Rie1

构建单位：马德里动物健康研究中心；马德里康普顿斯大学

效果：口服使用，对野猪Arm07毒株的感染的预防保护力为92%

研究阶段：安全有效评价

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7

类型：减毒活疫苗

构建策略：缺失特异性毒性相关的9GL(B119L)和UK(DP96R)基因

基因型：Ⅱ，美国

毒株：Georgia 2007

构建单位：美国农业部

效果：在体内，甚至在相当高的剂量下( 106HAD50 )对猪肌内施用ASFV-GΔ9GL/ΔUK也不会诱导疾病。重要的是，在感染28天后使用毒性的亲本毒株Georgia 2007攻击时，使用104或106HAD500感染的动物稳定地受到保护而免于临床疾病的表现。

研究阶段：安全有效评价

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8

类型：减毒活疫苗

构建策略：缺失：多基因家族360基因9L，10L，11L，12L，13L和14L；

和多基因家族505基因1R ，2R ，3R和4R。缺失DP148R基因

基因型：Ⅱ，英国

毒株：OURT88/3是来自葡萄牙的ASFV的非致病性分离株

构建单位：皮尔布莱特研究所

效果：本发明人已经发现，与肌内给药相比，鼻内施用减毒的ASF病毒在较低的剂量下是有效的。疫苗可以在初免-加强方案后施用。例如，在第一次接种后，受试者可以在一段时间(例如约7，14，21或28天)之后接受第二次加强施用。通常，加强施用的剂量高于初免施用的剂量。

研究阶段：安全有效评价

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9

类型：减毒活疫苗

构建策略：不详

基因型：Ⅱ，越南

毒株：不详

构建单位：越南国立农业大学

效果：在实验室和越南北部的三个农场使用效果良好

研究阶段：安全有效评价

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10

类型：核酸疫苗

构建策略：将重组K205R-IRES-A104R-IRES-E183L基因连接至pMD19-T载体，将亲本质粒转化感受态细胞，扩增后提取质粒即克隆质粒，在克隆质粒中提取目的片段；将目的片段进行体外转录即得mRNA。

基因型：不详，我国

毒株：不详

构建单位：四川农业大学

效果：不详

研究阶段：完成了构建，后续工作不详

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11

类型：重组腺病毒

构建策略：非洲猪瘟EP153R与P54基因共表达的重组腺病毒载体构建及腺病毒包装

基因型：不详，我国

毒株：不详

构建单位：扬州大学

效果：不详

研究阶段：完成了构建，后续工作不详

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以上都为从公开资讯获得的材料，图片来源于源文件，不包含其它在研但未公布的内容。

对于是否使用商业化的疫苗目前在我国业界依然存在一定的争议，同时对于临床上流行的各种所谓的“疫苗”大家需要擦亮双眼，避免上当受骗遭受双重损失，目前尚无任何一种非洲猪瘟疫苗商业化，即使到时有商业化的疫苗，对于不同的所谓的“疫苗”毒株，以及不同类型的野毒株之间都需要进行鉴别诊断，选择针对性的方法，避免不必要的损失。

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