蠕虫的常规检骋/P>
( 1 )虫体检查法:肉眼观察粪便中有无虫体。将被检粪便加人10 倍以上的清水,混匀沉淀,倒去上清液,反复数次,肉眼或放大镜在粪便中查找虫体,凭积累的经验或借助显微镜鉴别、/P>
( 2 )幼虫检查:有些线虫随粪便直接排出幼虫,有些是蠕虫卵在外界环境中很快孵化出幼虫。对皮类寄生虫的诊断可采用以下方法、/P>
漏斗幼虫分离法:取直肠内容物或新鲜粪便,平铺于直? - 4 厘米的漏斗内的筛上,漏斗下连接一根长? - 15 厘米的橡皮管,橡皮管末端接一根小试管。在漏斗内加?8 的清洁温水使液面与筛相接触,室温中放? 一2 小时,新孵出的活泼幼虫沉于小试管底,弃上清液,将沉淀物置于载玻片镜检,可见活动的幼虫、/P>
平皿幼虫分离法:取待检粪便3 一4 克,置于平皿或表面玻璃中,加适量40 温水,等5 一10 分钟后除去粪渣,用低倍镜检查平皿中的液体,观察有无活动的幼虫存在、/P>
幼虫培养检查法:圆形目的线虫虫卵,在形态结构及大小 相似,镜检往往难鉴别,为了确诊,常将幼虫经过培养,待发育成感染性幼虫后观测之。方法是将新鲜粪便塑成半球形置于平皿中,?5 一30 温度下(室内或温箱中,按情况每天加少量水)经几天,用漏斗幼虫分离法处理,查有无活动的幼虫、/P>
( 3 )虫卵检查法
涂片法:?0 %甘油水溶液一滴置于载玻片上,然后用小玻棒或小柴梗取粪便一小块,与上述溶液混合,将较粗的粪渣推向一边后,均匀涂布,盖上盖玻片,即可镜检。如无甘油水溶液亦可用常水替代。本法简单,检出率不高,需反复检查才能证实。② 沉淀法:利用比重低于虫卵的水处理被检粪便,使虫卵沉淀集中、/P>
自然沉淀法:取粪? 一5 克,加水彻底混合使成悬液,用40 一60 目/英寸的铜丝筛滤取大块物质,静?5 分钟后倾去上清液,如此反复直至上清液透明为止,弃去上清液,置沉淀物于载玻片,盖上盖玻片,镜检虫卵、/P>
离心沉淀法:取粪便约1 克置试管中,加入5 倍量的水使其成混悬液,用40 目/英寸的铜丝筛过滤人离心管中,?00 转/分离? 一4 分钟,吸取管底沉渣或小心弃去上清液,置沉渣于载玻片上,盖上盖玻片,镜检虫卵、/P>
漂浮法:采用比重大的溶液稀释粪便,使粪便中比重较小的虫卵漂浮集中到溶液的表面,再用显微镜检查。方法有如下几种:饱和盐水漂浮法:先配制食盐饱和溶液,在1000 毫升沸水中,加约36 0一380 克食盐,使溶解,以纱布过滤冷却后,如有结晶析出,即为饱和溶液。取粪便数克,置于小杯或试管中,加少量饱和盐水,仔细搅和,并逐渐加人饱和盐水,当溶液满至边际时,立即用筷子除去漂浮的大块粪便,然后静置半小时,此时比饱和盐水比重轻的蠕虫卵大多浮在表面,用铂金耳或金属小环在液体表面蘸取液膜数次,抖落在载玻片上,盖上盖玻片,进行镜检。蘸取液膜用的金属小环用后应在火焰上烧灼,以免把蠕虫卵带到下一份材料中去。本法亦可将混合的粪液注满顶立的小试管中,在试管口盖上盖玻片,使与液面相接触,并使之不留气泡。静?0 一45 分钟,将盖玻片迅速取下,覆于载玻片上镜检、/P>
硫酸镁饱和溶液:?000毫升水中溶解920 克硫酸镁。硫代硫酸钠饱和溶液:在1000 毫升水中溶解1750 克硫代硫酸钠,溶液保存在不低?5 温度中、/P>
筛滤法:本法是将粪便先制成悬液,使通过不同孔径的筛,先经过粗筛将粪便中较粗的渣滓(如食物纤维等)保留在筛上,而将虫卵和较细粪便保留于滤液中。再将此滤液通过极细的尼龙筛,将虫卵保留于尼龙筛上,而更细的粪渣和可溶性色素均随滤液通过。将尼龙筛上的内容物取出,进行镜检。一般粗滤可采用40 一60 目/英寸的铜丝筛,细筛可?60 目/英寸的尼龙筛。此法多用于大型及中型虫卵的检查、/P>
( 4 )蠕虫虫体的染色与鉴宙/P>
吸虫:将收集所得的吸虫放置在盛有生理盐水的小瓶中,活的虫体可在生理盐水中放置一定时间,使其将内容物吐出,并轻摇小瓶,洗去虫体表面的赫液。这种虫体是半透明状,将其平铺于载玻片上,镜检观察,其内部构造隐约可见。但未经染色,虫体结构并不十分清晰,且其虫体不能保存。如欲保存,可将洗净后的虫体放人20 %酒精或5 %一10 %的福尔马林溶液中、/P>
如欲制成染色装片标本,由虫体在固定前平铺于载玻片上,上覆盖另一载玻片,并用橡皮筋缚紧,使虫体平展,为防止虫体被过分压扁而破裂,可在玻片两端垫以适当厚度的纸片,而后放人上述固定液中? 一2 天后取出,分开玻片,取出虫体,仍浸于原来的固定液中,以备染色制成装片。常用的染色装片法有以下两种、/P>
苏木紫染色装片法:将存于福尔马林固定液中的虫体取出,在流水中冲洗,尽可能将福尔马林冲净。如虫体存于70 %酒精中,则需将虫体先移人60 %和30 %酒精中? . 5 一1 小时,视虫体大小而定,大的虫体需时较长,最后移人蒸馏水中。将德氏苏木紫染液用水稀?0 一15 倍,使呈葡萄酒色。经上述处理过的虫体移至稀释后的染液中,放置过夜,直至虫体内部各器官均已被深染为止。将虫体移人酸酒精(?0 %酒?00 毫升加人盐酸1 一2 毫升制成),至虫体褐色或淡红色、/P>
再于弱碱中复色,至虫体恢复到淡紫色(一般自来水或井水均呈弱碱性,即可用;亦可用蒸馏水加数滴氨水使呈弱碱性)。水洗虫体后顺序通过30 %?0 %?0 %? 。%?5 %各种浓度的酒精? . 5 一1 小时,而后移人100 %酒精中半小时使完全脱水,最后放人二甲苯中使虫体透明,待透明后立即装片。一般在二甲苯中时间不超过半小时,将完全透明的虫体,置于载玻片上,滴加树胶,盖上盖玻片即成。如树胶过于干硬,可加入二甲苯调成怡糖状、/P>
盐酸卡红染色装片法:将存于福尔马林中的标本取出,在流水中冲洗,洗去福尔马林,后依次经30 %?0 %和70 %酒精中? . 5 - 1 小时,保存于70 %酒精中的标本,无需处理即可染色。将上述标本移人盐酸卡红染液? -? 8 小时,然后在酸酒精中成褐色。用70 %酒精冲洗虫体,除去余酸。依次在80 %?5 %和100 %酒精中?0 分钟,再移人二甲苯中30 分钟透明后,置载玻片上,滴加树胶,覆以盖玻片封固、/P>
绦虫:绦虫的收集和保存与吸虫基本相同,但收集绦虫必须注意保持头节的完整,因为头节是鉴定绦虫的主要依据之一,而头节相对在整个虫体来说比较细小,易于散失。对于大型虫体,其体节可达数百节,若做染色装片标本,只能选其中一段成熟体节或孕卵体节作为制作标本之用。绦虫节片染色装片标本的制作与吸虫相同,但头节无需染色,只要将头节固定?0 %酒精中,而后依次?0 %?5 %和100 %的酒精中各5 - 10 分钟,使之脱水,再移人二甲苯? 一10 分钟透明后,置于载玻片上,滴加树胶,覆以盖玻片封固、/P>
线虫:收集的线虫应置于生理盐水中,充分振荡以洗去附着的豁液,尤其是那些具有较大口囊的虫体更需要充分清洗,以除去口囊内的杂物,但对寄生于肺内组织内的线虫,因其比较脆弱,清洗时易于崩解,应很快加以固定。固定前,可立即置于显微镜下检查,这时虫体是透明的,内部结构清晰可见。线虫固定最后用70 %酒精于烧杯中,为防止酒精挥发,使虫体变干,可加?0 %的浓甘油,然后加热至底部有气泡升起(约80 即可)。此外,亦可用福尔马林生理盐水(生理盐水90 份加人福尔马?0 份)固定虫体。固定后的虫体不透明,如欲观察内部结构,可加以透明,其透明方法有以下两种、/P>
甘油透明法:将保存的虫体置于含有10 %甘油的70 %酒精的蒸发器内,置37 温箱中,待酒精自然挥发后,虫体留于甘油中,虫体即已透明,可供检查。如欲快速检查虫体,可将上述蒸发皿水浴加温,促使酒精迅速挥发,而使虫体在短时间内达到透明的目的。以上经透明处理的虫体可长期保存于甘油中,随时可取出检查、/P>
乳酸酚透明法:甘油2 份、乳? 份、石炭酸1 份、水1 份,混合即成乳酸酚透明液。先将线虫标本置于乳酸酚透明? 份和? 份的混合液中,半小时后移人纯乳酸酚透明液中,虫体很快透明,可供检查。检查后虫体应迅速放回原保存液中,否则虫体易于变黑。一般线虫不做染色装片标本,如有需要制法同吸虫、/P>
( 5 )虫卵的保存:为了保存粪便中的蠕虫虫卵以利随时检查,可取粪便用沉淀法收集卵,将所得沉淀渣加?0 的福尔马林生理盐水中,再装人小瓶保存、/P>
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