生物技术也称生物工程,是人们以现代的科学原理,利用生物体或者生物的组织细胞及其组分的特征和功能,设计构建具有预期性状的新物种或新品系,以及与工程原理相结合进行加工生产,为社会提供产品和服务的一个综合性技术休系。生物技术自20 世纪70 年代以来,发展非常迅速,已成为目前新技术革命的重要组成部分。目前能够直接应用于猪生产的生物技术,除人工授精技术外还有诱发初情期、同期发情、诱发分娩、早期妊娠诊断及胚胎移植等。(一)诱发初情期在母猪达到性成熟之前的4 - 8 周,采用外源促性腺激素(孕马血清促性腺激素、人绒毛膜促性腺激素)结合公猪的接触促使青年母猪提前到达初情期,从而达到早配种早利用的目的:具体方法:给母猪注?50- 1 500lu 的孕马血清促性腺激素(P MsC ) , 72h 后注射人绒毛膜促性腺激素(HCG ) 500 1000lu ,同时与成熟公猪隔圈饲养,则母猪很快发情(HcG 注射?0 h ) .(二)同期发情同期发情指利用某些激素制剂人为地控制并调整一群母猪发情周期的进程,使之在预定的时问内集中发情,以便有计划地组织配种.其目的在于定时输精,便于合理组织集约化生产,实施科学化饲养管理,提高繁殖力,为胚胎移植创造条? .同期断奶对于正在哺乳的母猪来说,同期断奶是母猪同期发情通常采用的有效方法。一般断奶后1 周内绝大多数母猪可以发情,如果断奶同时注射IO00IU 的PMSG ,发情排卵的效果会更? .促进卵泡发育、排卵的药物在使用同期发情药物的同时.如果配合使用促性腺激素,可以增强发情同期化和提高发情率,并促使卵泡更好的成熟和排卵常用药物为PMsG 、HC ( ;、FsH 、IJI 等。使用孕激素作同期发情处理后,第一次发情的受胎率往往较低,但第二次发情的受胎率即趋正常。(三)诱发分娩黄体分泌的孕酮是维持妊娠所必需的,而前列腺素或其类似物可以引起黄体退化,是一种有效引发分娩的方法。母猪妊娠的时间?14 天,可以在预产期前l 一2 天注射前列腺素及其类似物,如果过早则会导致胎儿死亡率增加。在预产期前2 天每头猪肌肉注射氯前列烯? . 1 一0 . 5 。吧,最好安排在上午9 点至下午4 点注射,母猪在注射药?5 ?h 后分娩,平均产程? . 41 、前列腺素结合催产素、松弛素处理?4 - 30 - 1 分娩开始。在现代化大型猪场,利用生物技术人工控制母猪分娩时间具有重要意义,它能使母猪产仔相对集中,分娩时间安排在工作日的自天,这样便于劳动力的组织,有利于仔猪接产、助产、寄养和同期断奶、同期转群、同期消毒,真正实行“全进全出”的生产「艺。(四)胚胎移植胚胎移植是将一头优良母畜配种后的早期胚胎取出,移植到另一头同种的生理状态相同的母畜体内,使之继续发育成为新个体.。提供胚胎的个体称为供体,接受胚胎的个体称为受体。供体决定其遗传特性,受体只影响其体质发育猪胚胎移植的主要步骤有:供体超数排卵、胚胎采集、受体同期化处理以及手术法胚胎移植等? .供体超数排卵处理日前,母猪的超排一般采用注射孕马血清促性腺激素(PM 狱劲或者注射PMs (后再注射人绒毛膜促性腺激素(H (兀)的方法进行母猪超排反应主要取决于PMSC 的剂量对处于发情周期中的青年母猪注射HCC 可以诱导排卵,但排卵量增加很少;在发情期前肌肉注射so0IL7 HcG ,通常?4 -46h 后排卵。在发情周期的第15 一16 天注射PMsc ,可以诱导超排反应;促性腺激素的诱导通常会缩短发情而延长发情时间,并有可能引起卵泡囊肿,但排放的卵子具有理想的受精率。对超排的母褚进行公猪试情,不仅可刺激母猪发情,还能促进排卵,这一现象对猪的超排实践具有实际意义? .采集胚? 1 )冲胚液的配制:冲胚液和胚胎的短期培养液通常是用改良的杜氏磷酸盐缓冲液(D : . 1 ) lecco ' 5 PBs , DPBs ) ,见? 一9 。表3 一9 改良的杜氏磷酸盐缓冲液成分科学养猪幼11 人胎犊血清可以不加滋A (牛血清白蛋白( * *可J 月青霉索、链霉素、硫酸新霉素、庆大霉素根据配方要求分别制备I ?1 ?11 液,三蒸水加至最终量?0 % , 在冰箱中冷却? ,依次混合后用容量瓶定容至IO00ml ,注意防止沉淀,pH 应为7 ?-7 . 2 ,如不符,可用NaHc03 或Hcl 调节。配好后,用孔径? . 45 ?1 的过滤器过滤除菌,分装密封(注意无菌操作),标记? 冰箱保存3 一4 个月。临用前加人灭活犊牛血清,一般冲胚液? % - 5 % ,胚胎培养液?0 %一20 %? 2 )采胚方法:先用2 . 5 % 戈巴比妥钠静脉注射作全身麻醉后,在腹部靠倒数第!一2 对乳头间的腹中线切暴露子宫、输卵管及卵巢。回收输卵管内卵子和胚胎一般在宫管连接部进针一,用冲胚液逆向冲卵;或根据猪宫管连接部有一活塞状结构的特征从输卵管伞部注人冲卵液,在子宫角上端接取。当确认所有胚胎都已进人子宫角内时,可采用冲洗子宫角的方式,即从子宫角上端注人冲卵液,由基部接取。一般在发情配种2 . 5 天后从子宫回收胚胎,2 . 5 天前从输卵管回收? .受体同期化处理一般受体必须与胚龄同期化才能保证胚胎移植成功,但猎的情况较特殊,一般以受体猪较供体猪发情晚l 一2 天为最好。为了保证移植成功率,受体最好能够进行同期发情处理? l )选择与供体发情期自然同步的猪作受体:在供体超排时也可同时处理受体,药物剂量适当降低一些? 2 )同期断奶:母猪一般在断奶? 周左右出现发情并排卵,如果在断奶同时注射PMSG75O - 1 OO0lU 和HCC8oolU ,则可提高同期发情率和受胎率? 3 )药物法:青年母猪皮下理?00 , ng 乙基去甲攀?0 天,或每日注?0 mg ,持?8 天,停药? 一7 天发情率可达80 %以上,受胎率为60 %一70 % ; 4 .胚胎移植胚胎的移植就是把胚胎再放人受体的生殖道的适当部位,使其继续发育为胎儿,是整个胚胎移植技术的关键一环几在胚胎移人受体之前,需要对回收的胚胎进行形态学检查检查内容包括:胚胎的发育程度是否与胚龄一致、胚胎的可见结构是否完整、卵裂球的致密程度、卵裂球细胞大小是否均匀一致等? l )移植前受体的准备:受体于移植前应证实其卵巢上有发育良好的黄体猪可用腹腔镜检查确定黄体的数量、质量和分布情况,并进行记录。采用手术移植时,受体在术前12 一24 小时要停食? 2 )移植方法:对受体进行腹部手术,取出子宫和输卵管,根据胚胎发育情况,将胚胎移人输卵管或子宫角。手术移植的基本过程与手术采胚相似。如术前已确定卵巢上有功能性黄体,手术部位可选在黄体侧;如术前未确定黄体,手术时要检查黄体,无黄体或黄体小的受体不能移植移胚管有玻璃管、塑料管及带塑料套管的针管等,接1 , nl 注射器,吸入新鲜的经改良的杜氏磷酸盐缓冲液三段于管中,中段含胚胎。输卵管移植时,将移胚管经伞部腹腔孔插人输卵? 一3 0? ;注人胚胎;子宫角移植时,在黄体侧子宫角的前1 / 3 处先用钝针将子宫角开洞,再插人移胚管,确认在子宫角腔内后注人胚胎移植时要避免注人空气,抽出移胚管时要慢,防止将胚胎带出。对术后的供、受体要注意护理和饲养管理,保证其健康同时要注意观察,确定其状态,并做好记录
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